熒光分光光度計的基本結構與原理

熒光分光光度計的基本結構與原理

熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等很多物理參數,從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過(guò)對這些參數的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計的激發(fā)波長(cháng)掃描范圍一般是190~650nm，發(fā)射波長(cháng)掃描范圍是200~800nm?？捎糜谝后w、固體樣品（如凝膠條）的光譜掃描。 

基本結構與原理 

由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過(guò)濾過(guò)和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數字的形式顯示出來(lái)。 

基本結構和原理，光源與檢測器成直角方式安排。

    1. 光源：

為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈，后者能發(fā)射出強度較大的連續光譜，且在300nm～400nm 范圍內強度幾乎相等，故較常用。 

2．激發(fā)單色器：

置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或*單色器，篩選出特定的激發(fā)光譜。 

3．發(fā)射單色器：

置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器，常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。

4． 檢測器：

一般用光電管或光電倍增管作檢測器?？蓪⒐庑盘柗糯蟛⑥D為電信號。

5． 樣品室：

通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。丈量液體時(shí)，光源與檢測器成直角安排；丈量固體時(shí)，光源與檢測器成銳角安排。